высокомолекулярное органическое соединение,
биополимер (полинуклеотид), образованный остатками нуклеотидов. Нуклеиновые
кислоты ДНК и РНК присутствуют в клетках всех живых организмов и выполняют
важнейшие функции по хранению, передаче и реализации наследственной информации.
Описаны многочисленные методики выделения нуклеиновых кислот из природных
источников. Основными требованиями, предъявляемыми к методу выделения, являются
эффективное отделения нуклеиновых кислот от белков, а также минимальная степень
фрагментации полученных препаратов. Классический метод выделения ДНК был описан
в 1952 году и используется в настоящее время без значительных изменений[7].
Клеточные стенки исследуемого биологического материала разрушаются одним из
стандартных методов, а затем обрабатываются анионным детергентом. При этом
белки выпадают в осадок, а нуклеиновые кислоты остаются в водном растворе. ДНК
может быть осаждена в виде геля осторожным добавлением этанола к её солевому
раствору. Концентрацию полученной нуклеиновой кислоты, а также наличие примесей
(белки, фенол) обычно определяют спектрофотометрически по поглощению на А260
нм.Нуклеиновые кислоты легко деградируют под действием особого класса ферментов
— нуклеаз. В связи с этим при их выделении важно обработать лабораторное оборудование
и материалы соответствующими ингибиторами. Так, например, при выделении РНК
широко используется такой ингибитор рибонуклеаз как DEPC.Нуклеиновые кислоты
хорошо растворимы в воде, практически не растворимы в органических
растворителях. Очень чувствительны к действию температуры и критическим
значениям уровня pH. Молекулы ДНК с высокой молекулярной массой, выделенные из
природных источников, способны фрагментироваться под действием механических
сил, например, при перемешивании раствора. Нуклеиновые кислоты фрагментируются
ферментами — нуклеазами.